使用糖尿病模型小鼠,不可忽視的“10要“和”10不要“
2023-05-08
使用糖尿病小鼠是一項富有挑戰(zhàn)的工作,為減少實驗小鼠的不穩(wěn)定性并獲得一致性的結果,我們總結出使用最熱門的糖尿病小鼠模型做實驗要注意的10要和10不要。
10要
1. 經常檢查水的供應,保證足夠的供應:糖尿病小鼠攝水量比野生型小鼠多。
2. 確保小鼠能夠正常獲得水和食物:肥胖小鼠跟對照小鼠相比起來,在找到食物和水方面更困難一些。
3. 提供多余的食物:如果你在用食欲過盛的小鼠做實驗,比如ob/ob 小鼠 和db/db 小鼠,請?zhí)峁┒嘤嗟氖澄铩?/span>
4. 提供更多的墊料:因為糖尿病小鼠是典型的多尿品系。
5. 更加頻繁的換墊料(一周兩次):使用多尿的品系時,可以考慮用纖維素類的墊料像ALPHA-Dri?,這種墊料具有很好的吸水性,能有效的控制氨含量。
6. 給予更多的關注。壓力會延遲小鼠疾病的發(fā)生,使他們的表型減弱。
7. 選擇合適鼠齡的小鼠用于實驗:因為很多糖尿病小鼠的疾病發(fā)生是與年齡相關的。
8. 選擇合適的性別用于實驗:很多時候,外顯率和疾病的嚴重性是與性別相關的。例如,在20周鼠齡時,只有50%的NOD/ShiLtJ雄鼠會得糖尿病,但是會有90%的同齡雌鼠會得糖尿病。
9. 做一個全面的分析來確定樣本的數量:準備額外的小鼠,確保有足夠的小鼠數量用于表達某一特定表型的研究,使實驗數據具有統(tǒng)計學意義。
10. 考慮滾動式的實驗設計:在你沒有大量小鼠的情況下,糖尿病的生物學模型經常需要非同步的研究,但是一些誘導模型(STZ 阻斷beta細胞)不能進行非同步研究。
10不要
1. 避免給小鼠壓力:小鼠的糖尿病表型對惡性應激很敏感。應激水平可能會影響與小鼠體重增加和高血糖癥的出現,這一點在lep ob/ob 和lepr db/db Ⅱ型糖尿病小鼠身上表現及其明顯。積極采取預防措施可以增強表型穩(wěn)定性。
2. 不要忽視動物福利帶來的效益:塑料型的方形鼠籠或圓形鼠籠,軟纖維嵌套材料、咀嚼材料像Nylabones?,這些都可以減少應激,促進小鼠行為。
3. 不要忽視動物設施環(huán)境:病原體的存在會延遲或阻止糖尿病的發(fā)生(在NOD 小鼠身上表現及其明顯)。
4. 不要不定時測量血糖:測高血糖的最佳時期是在早上(在一晚上很好的休息和飲食之后)。
5. 不要用不同的采血方式:采血方式的不同血糖值會有有差異。(如眼球取血和尾靜脈取血)
6. 即使相同,也不是所有的小鼠都會在同一時間點出現高血糖:需備多余的小鼠彌補這一缺陷。
7. 避免使用純合子小鼠(lep ob/ob or lepr db/db)來繁育:肥胖糖尿病小鼠有其他活動(吃)。另外,純合子的小鼠是不育的。
8. 不要在食盒中放置食物:由于Type 2 db 糖尿病小鼠會出現肥胖,所以在鼠籠底部上多放些食物能確保小鼠很容易吃到,即使到他們很非常胖的時候依然可以吃到。
9. 如果您準備買小鼠做實驗,避免小鼠到達后立即開始試驗:適應環(huán)境是非常關鍵的,根據不同的需要,適用期不同,但最好是至少是2周左右。在適應期間,小鼠可能運輸的應激狀態(tài)中恢復,并重新適應新環(huán)境。
10. 不要將不同背景但相同突變的小鼠混養(yǎng)和交配:糖尿病表型是受品系背景的影響的。例如,Lepr<db>突變的 C57BLKS基因背景的小鼠(stock # 000642)出現晚期糖尿病伴隨胰島萎縮。他們都是高血糖的,隨著時間會越來越嚴重。另一方面,Lepr<db>突變的C57BL/6J基因背景的小鼠(stock # 000697)不會出現晚期糖尿病和胰島萎縮。這些小鼠是很好地研究早期糖尿病模型,它們的表型在14-16周的表現突出。
轉自:The Jackson laboratory