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基因敲入

2022-08-14

基因敲入(Knock-in)模型的應(yīng)用:

  • 模擬人類遺傳機(jī)制,探索致病機(jī)制

  • 示蹤基因表達(dá)

  • 進(jìn)行譜系示蹤,追溯細(xì)胞起源

  • 將小鼠基因人源化,加速藥物研發(fā)

  • 將分子遺傳學(xué)工具引入小鼠模型中


基因敲入模型包括

  • 常規(guī)基因敲入

  • 點(diǎn)突變

  • 條件性點(diǎn)突變

  • 人源化


通過CRISPR基因編輯技術(shù),構(gòu)建一個(gè)基因敲入小鼠模型一般需要6-9個(gè)月。

通過ES細(xì)胞打靶技術(shù),構(gòu)建一個(gè)基因敲入小鼠模型一般需要9-12個(gè)月。

您可以聯(lián)系我們的技術(shù)顧問,為您設(shè)計(jì)并定制您的基因敲入小鼠模型。





常規(guī)基因敲入

外源基因共表達(dá)策略:

image.png



外源基因替代小鼠內(nèi)源基因表達(dá)策略(即敲入同時(shí)敲除):

 image.png




點(diǎn)突變


將點(diǎn)突變(人類致病候選點(diǎn)突變)引入到小鼠同源基因?qū)?yīng)位置。

image.png



   

 

條件性點(diǎn)突變

將點(diǎn)突變(人類致病候選點(diǎn)突變)與Cre-LoxP系統(tǒng)結(jié)合,引入到小鼠同源基因?qū)?yīng)位置,可實(shí)現(xiàn)組織特異性點(diǎn)突變。

 image.png


通過插入Loxp位點(diǎn)和含有突變位點(diǎn)的Exon實(shí)驗(yàn)基因的條件性點(diǎn)突變。

條件性基因點(diǎn)突變ES打靶策略示意圖.png




   


人源化

將小鼠內(nèi)源基因替換為人源同源基因,構(gòu)建用于疾病、免疫、生理學(xué)研究以及抗體藥物篩選及藥效評價(jià)的人源化基因工程小鼠模型。


完整替換策略:

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直接插入人源cDNA策略:

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